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elisa原理

来源:网易  编辑:史媛泽生活百科2025-02-21 12:41:35

Elisa(酶联免疫吸附测定)是一种广泛应用在医学和生物学研究中的检测技术,主要用于检测特定抗原或抗体的存在。这项技术结合了固相免疫测定的便捷性和酶联反应的高度敏感性,使得Elisa成为一种非常有效的工具,用于疾病诊断、疫苗效力评估以及基础科学研究。

Elisa的基本原理

Elisa的核心在于其能够通过特异性抗体与抗原之间的相互作用来识别和量化目标分子。这一过程主要涉及四个步骤:

1. 包被:首先将待测抗原固定到固相载体上,通常是微孔板的形式。这一步骤确保了抗原的稳定性和可检测性。

2. 封闭:为了防止非特异性结合,通常会在包被后进行封闭处理,加入封闭剂,如牛血清白蛋白(BSA),以覆盖未被包被的区域。

3. 孵育与检测:加入含有针对目标抗原的特异性抗体(即一抗),这些抗体可以识别并结合到抗原上。随后,加入带有酶标记的二抗,它能与一抗结合。在适当的条件下,这种酶标记物可以在加入相应的底物时产生颜色变化,从而实现对目标抗原的定量分析。

4. 显色与读取:最后一步是添加酶的底物,通过颜色的变化来指示目标抗原的存在与否及其浓度。颜色的变化程度与样品中目标抗原的浓度成正比,可以通过分光光度计等设备精确测量。

应用领域

Elisa因其高灵敏度、高特异性及相对简便的操作流程,在多个领域得到应用,包括但不限于传染病的诊断(如HIV、肝炎)、自身免疫疾病的筛查、癌症标志物的监测以及药物研发等。

总之,Elisa作为一种成熟的免疫学检测技术,凭借其高效、准确的特点,在现代医学和生物学研究中扮演着不可或缺的角色。

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