DPPH自由基清除能力测定
DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)是一种稳定的氮氧自由基,在有机溶剂中呈现深紫色,其最大吸收波长约为517 nm。当遇到具有抗氧化性质的物质时,DPPH自由基会被还原为无色的1,1-二苯基-2-苦基苯肼(DPPH-H),导致溶液颜色变浅,吸光度降低。因此,通过测量反应前后溶液吸光度的变化,可以定量评估样品的抗氧化能力。
DPPH自由基清除能力测定法因其操作简单、快速且重复性好,被广泛应用于天然产物、食品、药品等领域的抗氧化活性研究。实验过程中,通常将一定浓度的DPPH溶液与不同浓度的待测样品混合,在特定波长下测定吸光度,并以抗坏血酸或Trolox(维生素E类似物)作为阳性对照,计算出样品的IC50值(即抑制50% DPPH自由基所需的浓度)。IC50值越小,表明样品的抗氧化能力越强。
此外,该方法还能够帮助筛选高效抗氧化剂,为开发新型功能性食品添加剂提供科学依据。然而,在实际应用中,应注意选择合适的溶剂体系及温度条件,避免其他非特异性干扰因素影响结果准确性。总之,DPPH自由基清除能力测定已成为评价物质抗氧化性能的重要工具之一。